Etudes Mol culaire Et Cellulaire Du G ne Cftr

La mucoviscidose est la maladie génétique grave ŕ transmission autosomique récessive la plus fréquente dans les populations d'origine européenne. L'objectif de nos travaux est de comprendre l'impact des mutations du gčne CFTR afin d'établir un conseil génétique avisé. Pour cela, nous avons dans un premier temps déterminé quelles sont les mutations présentes sur l'exon 9 du gčne. A cause de la présence de copies de cette région, nous avons établi de nouvelles conditions expérimentales pour étudier exclusivement le gčne, et ainsi deux pseudomutations ont été détectées. Dans un second temps, nous avons étudié trois allčles complexes contenant des mutations fréquentes de CFTR (D443Y, G576A, R668C) et une mutation rare, G149R. In vitro nous avons mis en évidence l'effet délétčre de G149R seule ou en complexe, et la diminution de la quantité de la protéine mature lorsque les autres allčles complexes sont présents. Dans la derničre partie de ce travail, nous avons mis en place au laboratoire les techniques d'étude de l'épissage. Pour cela, nous avons construit un minigčne hybride qui nous permet de définir le rôle exact des substitutions nucléotidiques sur l'épissage alternatif.